冷胁迫是印象农植物销售量的主耍氛围探索其一。钙依懒性核蛋白激酶（CDPKs/CPKs）可将钙（Ca²⁺）数字信号获取到生殖细胞并刺激对困境反应的关健调准分子，但其政策调控制度尚不清析。

2025年4月，浙江大学周艳虹教授团队在New Phytologist杂志上发表题为“CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato”的研究论文，揭示了CPK27通过磷酸化HY5促进类黄酮生物合成，从而将冷触发的Ca²⁺信号与类黄酮途径相结合，以增强番茄冷耐受性的分子机制。本文为理解冷信号转导提供了重要策略，拜谱生物为该研究提供了磷碱化淡化位点检侧服务。

英文翻译子标题：CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato（New Phytologist IF：8.3）

中文名一级标题：CPK27通过磷酸化HY5促进黄酮类化合物的生物合成来增强番茄的耐寒性

加盟商部门：浙江大学

科研素材：番茄

拜谱具备新技术：磷硝化作用遮盖位点判断

研究方案方法：

一、理论研究报告单

1、CPK27在常温胁迫下表达出调涨，得以明显增强茎叶抗寒性

已往探索呈现，CPK27在冷胁迫條件下表现调涨。为认可该没想到，选文中我们利用CPK27的5个敲除突变性系（cpk27 #2，#6）展开抗冻性测量，是因为CPK27的转录平均水平方向明显性如果超过对比组（图1a-b）。在CPK27表现被减缓的草本花卉中，对抗冻性的提升能力明显性弱化。进每一步一个脚印的亚癌人体细胞wifi定位与激发探索呈现，冷胁迫可以淡化CPK27向癌人体细胞沉淀，并提升其磷过酸平均水平方向（图1 f）。免疫抗体痕迹探讨进每一步一个脚印断定冷胁迫帮助 CPK27 在核内血清丰度新增、胞内丰度才能减少，外源CaCl₂治疗可大部分完全恢复cpk27的冷比较敏感表型，呈现CPK27信任Ca²⁺卫星信号起着能力。（图1g-k）

图1 CPK27以Ca²⁺依赖感玩法明显增强番茄耐旱性

2、CPK27能够 国家宏观调控黄大环内酯聚合条件排解恒温受伤

转录组测序然而信息显示，CPK27的过表达出来爱偏态调涨黄胺类海洋生物转化成涉及到dna组，如CHS、CHI和FLS等，同一时间黄胺类代谢率环路偏态聚集。而CPK27转变体中这么多dna组表达出来爱再降，建议CPK27依据利于黄胺类转化成可以帮助茎叶消除冷藏胁迫所带来的空气氧化压力差（图2a-e）。

图2 RNA-seq探讨CPK27管控的冷加载失败基因组

3、HY5是CPK27介导的抗寒走势径路中的关健靶标

为验证确认 CPK27 与 HY5 的之间间用，做者第一方面去了鲜酵母双混种（Y2H）测试，数据得知这两种普遍有着之间间用（图3a）。双原子荧光互补性（BiFC）测试进的一步表面CPK27 与 HY5 在血细胞内发生了之间间用（图 3b）。接下来确认天然免疫共水解等科技，挖掘HY5与CPK27在植被休内普遍有着之间间用，且这两种的之间间用都具有钙铁离子（Ca²⁺）信任性（图 3c）。于此，在Co-IP测试的核蛋白抽取前施用冷胁迫操作，数据显现冷胁迫可不断增强HY5与CPK27的之间间用（图 3d）。

图3 CPK27与HY5互作并磷硝化作用其要点位点

4、CPK27磷过酸HY5加强其转录灵活性，有利于黄胺类基因组表达方法

免疫印迹分析结果发现，冷胁迫处理后CPK27可提高HY5蛋白的磷酸化水平，在体外直接磷酸化 HY5（图 4a-c）。通过磷酸性反应修饰语位点判断，发现HY5蛋白的S23和S57两个潜在磷酸化位点。为验证这些位点的功能，作者通过构建非磷酸化突变体，进行磷酸化水平验证，其中双突变体的磷酸化水平下降更为明显（图 4d）。这些结果表明，CPK27 介导的 HY5 磷酸化依赖于 S23 和 S57 这两个特定位点。

图4 CPK27磷碱化HY5并明显增强其相对稳定量分析

5、CPK27 在类黄酮海洋生物聚合环路中效用于HY5的长江上游

全方位的遗传基因表达出和产微生物阐述结杲（图5），CPK27在冷胁迫死机步骤中功效于HY5的品牌进入校园市场，经由调整 HY5 介导的类黄酮微生物合成图片通道影响力植被耐旱性。

图5 CPK27用途于HY5品牌进入校园市场

二、本文工作小结

与此同时所写，下面实验揭示CPK27磷酸性反应装饰HY5淀粉酶，更改密码类黄酮制作而成渠道，利于抗防氧化化学物质1个，因而资料耐热力量。该实验说明了“Ca²⁺-CPK27-HY5-类黄酮”级联改善规则（图6），验证CPK27介导的HY5磷酸性反应是对接钙网路信号与次生代谢转化防御性的要素各个环节，为体谅绿植的苦难积极地响应网路展示了新视距。

图6 CPK27-HY5模块电源加强草本花卉接受冷胁迫的工作机制

三、拜谱总结

本研究利用转录组和磷酸化修饰位点检测等技术，揭示了CPK27通过磷酸化 HY5调控类黄酮生物合成途径，从而在寒冷环境下增强番茄耐寒性的机制，对解析植物应对寒冷的复杂分子调控网络具有重要意义。拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的淀粉酶质组学、掩盖淀粉酶质组学、代谢转化组学、转录组学等两组学成品技术服务，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。欢迎咨询！

分类论文：Lin R, Zhang W, Tian R, et al. CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato. New Phytol. 2025;246(5):2174-2191. doi:10.1111/nph.70134